ELISA通用试剂盒/Universal ELISA Assay Kit (No Special Indicators)

试剂盒分类：

ELISA通用试剂盒/Universal ELISA Assay kit (No special indicators)

PCDBA0801——Anti mouse/Rabbit IgG coated plate & Detection (Anti Mouse/Anti Rabbit)HRP

PCDBA0802——Cleand Coated plate & Detection (Anti Mouse/Anti Rabbit)HRP

使用原则：

我们需要明确为配对的抗体对（分别针对相同免疫原不同免疫位点的两组抗体）

操作方法：

PCDBA0801——Anti mouse IgG coated plate & Detection （Anti Mouse/Anti Rabbit）HRP

将包被抗体 （Capture Antibody）按照抗体说明书稀释比例，利用抗体稀释液稀释至工作浓度（抗体稀释液可以为含有BSA的PBS或TBS，也可直接选择ELISA抗体稀释液1X或Y-Tec稳定型抗体稀释液），100ul/孔加入96孔ELISA反应板，室温2h或4℃过夜；甩弃残液，利用Assay buffer B，按照200ul/孔加入反应板，室温2h或4℃过夜，甩弃残液，拍干，待用；

反应步骤：50-100ul/孔加入抗原或样本液（注意此步骤中，样本浓度过高需利用Assay buffer C稀释至适当浓度加入，以避免hook效应导致的假低值），37℃反应60-90min，甩弃残液，不洗涤，加入检测抗体（detection Antibody）工作液，检测抗体加入前需按照抗体说明书稀释比例，利用Assay buffer D稀释至工作浓度；37℃反应60min，利用Washing Buffer 1X，300ul/孔，洗涤3次；加入Detection HRP工作液，37℃反应15-30min，利用Washing Buffer 1X，300ul/孔，洗涤5次；加入TMB显色底物，避光5-30min（至低浓度反应孔呈现明显梯度截止）加入TMB终止液；酶标仪单波A450nm或双波A450nm/A630nm进行检测OD值。

PCDBA0802——Cleand Coated plate & Detection （Anti Mouse/Anti Rabbit）HRP

将包被抗体 （Capture Antibody）按照抗体说明书稀释比例，利用Assay buffer A配制后，100ul/孔加入96孔ELISA反应板，4℃过夜（16-20h）；甩弃残液，利用Assay buffer B，按照200ul/孔加入反应板，室温2h或4℃过夜，甩弃残液，拍干，待用；

反应步骤：50-100ul/孔加入抗原或样本液（注意此步骤中，样本浓度过高需利用Assay buffer C稀释至适当浓度加入，以避免hook效应导致的假低值），37℃反应60-90min，甩弃残液，不洗涤，加入检测抗体（detection Antibody）工作液，检测抗体加入前需按照抗体说明书稀释比例，利用Assay buffer D稀释至工作浓度；37℃反应60min，利用Washing Buffer 1X，300ul/孔，洗涤3次；加入Detection HRP工作液，37℃反应15-30min，利用Washing Buffer 1X，300ul/孔，洗涤5次；加入TMB显色底物，避光5-30min（至低浓度反应孔呈现明显梯度截止）加入TMB终止液；酶标仪单波A450nm或双波A450nm/A630nm进行检测OD值。