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货号:PWQ002-010 规格:125T(0.75mm胶)
产品简介:
蛋白电泳经常使用聚丙烯酰胺凝胶(PAGE凝胶)来实现蛋白分离,此类凝胶一般由上层胶和下层胶两部分组成,前者起到将蛋白样品进行浓缩的作用,后者则是根据凝胶所使用的丙烯酰胺单体和N,N-亚甲基双丙烯酰胺(甲叉丙烯酰胺)交联剂的浓度不同从而分离不同大小范围的蛋白质。
使用本产品凝胶制备试剂操作简单,只需加入改良型促凝剂即可凝胶,配制一块或多块凝胶最少只需2分钟的动手操作时间。本试剂盒所配制凝胶可兼用于变性和非变性PAGE凝胶电泳。
产品组成:
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组分名称 |
组分体积 |
储存条件 |
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下层胶A液 |
250mL |
4℃保存 |
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下层胶B液 |
250mL |
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上层胶A液 |
100mL |
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|
上层胶B液 |
100mL |
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改良型促凝剂 |
10mL |
4℃可存放3个月,-20℃可存放一年 |
产品特点:
1. 快速制备凝胶——无需计算所需溶液量,无需稀释。
制胶步骤:下层胶凝胶时间约为15-20min,上层胶凝胶时间约为5-10min;
2. 条带清晰——可适合用于20-80KDa之间的分子条带,蛋白质分率高。
3. 电泳时间快——160V恒压,快速电泳液(磐超生物,PWQ001)电泳完成只需35min。
制胶流程:
制胶:
(以制一块0.75/1.0/1.5 mm的mini胶为例)
1. 取等体积下层胶A液和下层胶B液混匀,即取两种溶液各2.0/ 2.5/ 3.8 mL。
2. 往步骤1中的混合溶液中加入40/ 50/76 uL 的改良型促凝剂,混匀,注入制胶玻璃板。
3. 加入适量水或乙醇覆盖于下层胶之上;
4. 待下层胶凝固后(15min-20min),倒去上层水或醇(注意:此溶液为过量,请勿全部注入,可留少许于配胶杯中,以判断胶凝固状况)
5. 取等体积上层胶A液和上层胶B液混匀,即取两种溶液各 0.8/1.0/ 1.5 mL,加入16/20/30 uL的改良型促凝剂,混匀。
注:使用前请将上层胶B液摇匀。
6. 注入制胶玻璃板,使液面和短玻璃板上沿之间的距离比梳齿长 0.5 cm 即可,插入梳
7. 待上层胶凝固后(约8min),拔去梳齿即可用于电泳。
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下层胶配方 |
上层胶配方 |
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厚度 |
下层A液 |
下层B液 |
改良型 促凝剂 |
上层A液 |
上层B液 |
改良型 促凝剂 |
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0.75mm |
2.0mL |
2.0mL |
40uL |
0.8mL |
0.8mL |
16uL |
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1.0mm |
2.5mL |
2.5mL |
50uL |
1.0mL |
1.0mL |
20uL |
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1.5mm |
3.8mL |
3.8mL |
76uL |
1.5mL |
1.5mL |
30uL |
储存及运输条件:
运输:RT/2-8℃,保存:2-8℃ 有效期:12 个月
注意事项:
1.改良型促凝剂4℃可存放3个月,-20℃可存放1年;
2.本产品常温运输,改良型促凝剂溶液的使用量仅作参考,实际用量可根据个人实验习惯和经验增加或减少。加入较多量的改良型促凝剂可加快凝胶速度,反之亦然;
3.凝胶速度与温度有显著的正相关性。同等条件下,温度越高,凝胶速度越快,室温过高时建议适当减小改良型促凝剂的用量;相反,如果室温较低,可适当延长凝胶时间;
4.在配胶之前,使下层胶和上层胶溶液平衡到室温(如室温放置几分钟),可有效避免凝胶中气泡的形成;
5.本产品在Tri-Gly电泳系统和MOPS电泳系统中均可适用,推荐使用MOPS电泳系统;
6.本产品推荐电泳条件为:120-180V之间,如需要加快电泳速度,可增加至200V;
7.为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作;
8.本产品仅限科研使用。
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