➽ 细胞冻存步骤：
1.常规方法收集对数期的贴壁细胞或悬浮细胞于试管中；
2.确认所需冻存的细胞数量；
3.将所需冻存细胞收集于离心管中，1000rpm，5min 离心，收集细胞沉淀，并弃
掉上清液；
4.加入适量的无血清细胞冻存液于离心管中，加入量按照细胞保存浓度为 5X10 5
至 1X10 7 /ml 密度，轻柔的混匀细胞，获取细胞混合液；
5.将获取的细胞混合液按照 1~1.5ml/管，分装于冻存管中；
6.将冻存管直接放入-80℃保存，可长期保存。
➽ 细胞复苏步骤：
1.从-80℃取出冻存细胞，立即放入 37℃水浴锅快速解冻；
2.待细胞混合液彻底解冻融化后，立即加入 1ml 细胞培养基，混合；
3.将混合液移至含有约 5ml 该细胞培养基的离心管中，1000rpm，5min 离心，弃
掉上清，获取细胞沉淀；
4.加入适量的新鲜细胞培养基，轻柔混匀，并将混合液转移至培养容器，观察细
胞状态正常后，进行后续细胞培养工作。
➽ 保存条件 ：
常温运输，4℃保存，长期不用，-20℃保存，有效期 24 个月。
➽ 使用 注意事项: :
1. Y-Tec 无血清细胞冻存液在冻存细胞分装后，需要尽量缩短在外存放时间，操
作完成后需尽快移入到-80 ℃超低温冰箱中。
2. Y-Tec 无血清细胞冻存液中含有 DMSO 成分，对于 DMSO 敏感的细胞株，以及
非常规细胞株，比如原代细胞，干细胞（ES 细胞）等特殊细胞类型，均需要在
使用前试用是否可以直接用该产品冻存目的细胞，先对所冻存的胞进行至少为期
1 -4 周的该产品试验性细胞冷冻保存培养，确认没有任何问题后再进行正式大量
冻存。
免责声明: 本公司将不为任何非正常使用产品导致的损失与意外负责
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